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尿蛋白含量檢測(cè)試劑盒 微量法
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

中文名稱
尿蛋白含量檢測(cè)試劑盒 微量法
單位
盒
有效期
6個(gè)月
儲(chǔ)存條件
-20℃
英文名稱
Urine Protein Content Assay Kit
檢測(cè)方法
微量法
規(guī)格
100T/96S

產(chǎn)品型號(hào):BC5655-100T/96S

更新時(shí)間:2024-04-23

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1319

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹

尿蛋白含量檢測(cè)試劑盒說明書(麗春紅比色法)

微量法

貨號(hào):BC5655

規(guī)格:100T/96S

產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

試劑一

液體12 mL×1瓶

2-8℃保存

試劑二

液體24 mL×1瓶

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

液體1 mL×1支

-20℃保存

溶液的配制:

1、 試劑一工作液:臨用前根據(jù)樣本數(shù)量按照試劑一:蒸餾水=0.1mL:0.9mL(1mL,1T)的比例配制試劑一工作液;

2、 標(biāo)準(zhǔn)品:5mg/mL BSA標(biāo)準(zhǔn)液。臨用前取80μL 5mg/mL BSA標(biāo)準(zhǔn)液,加入920μL蒸餾水,配制成0.4 mg/mL BSA標(biāo)準(zhǔn)液,現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說明:

尿液中蛋白含量增加,表明腎臟系統(tǒng)的重吸收作用減弱,通??勺鳛槟I臟疾病臨床診斷的輔助依據(jù)。

在尿液樣本中加入蛋白沉淀劑和麗春紅染料,離心得到的蛋白質(zhì)-染料復(fù)合物可溶解于堿性溶液,檢測(cè)其在560nm處的吸光值可計(jì)算得到樣本蛋白含量。

 

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、離心機(jī)、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、2mL EP管、冰和蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理

1. 尿液等液體樣本:直接測(cè)定。若有渾濁請(qǐng)離心后取上清置于冰上待測(cè)。

二、測(cè)定步驟

1.可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至560nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

2.操作表:

試劑名稱(μL)

測(cè)定管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

蒸餾水

-

-

400

標(biāo)準(zhǔn)品

-

400

-

樣本

400

-

-

試劑一工作液

1000

1000

1000

 

充分混勻,3500rpm常溫離心10min,棄全部上清,留全部沉淀。

試劑二

200

200

200

充分溶解沉淀,于560nm處測(cè)定各管吸光值,分別記為A測(cè)定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白,計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)1-2次。

三、尿蛋白含量計(jì)算

尿蛋白含量(mg/mL)= ΔA測(cè)定×(C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V樣÷V樣= 0.4×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)

C標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)管濃度,0.4mg/mL;V樣:加入樣本體積,0.4mL。

注意事項(xiàng):

1、 實(shí)驗(yàn)過程中離心步驟結(jié)束后,上清液需要全部除去,同時(shí)不可損失沉淀,否則會(huì)影響比色結(jié)果。

2、 如果?A測(cè)定小于0.006或測(cè)定管吸光值接近空白管,可以增加樣本量后再進(jìn)行測(cè)定;如果?A測(cè)定大于0.4,建議將樣本用蒸餾水適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。

 

參考文獻(xiàn):

[1] Michael A Pesce, Carl S Strande. A new micromethod for determination of protein in cerebrospinal fluid and urine[J]. Clinical Biochemistry, 1973, 19(11): 1265-1267. 

[2] Jean Dube, Joel Girouard, Pierre Leclerc. et al. Problems with the estimation of urine protein by automated assays[J]. Clinical Biochemistry, 2005, 38(5): 479-485.

[3] Pan Ya. An analysis about the quantitative measurement of urinary protein[J]. China Health Standard Management, 2014, 5(18): 125-126. 

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