儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)活性檢測試劑盒
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Soil Alkaline Phosphatase(S-AKP/ALP) Activity Assay Kit
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/96S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號：BC0285-100T/96S

更新時(shí)間：2024-04-09

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：2037

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

土壤堿性磷酸酶（S-AKP/ALP）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC0285
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
試劑一	液體42 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體2.5 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四	粉劑×2支	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	液體1 mL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：臨用前加100 mL蒸餾水充分溶解，2-8℃保存8周；
試劑四：臨用前取1支加576 μL無水乙醇（自備），24 μL蒸餾水充分溶解。用不完的試劑2-8℃保存一周（變褐色后不能再使用，一瓶即可以實(shí)驗(yàn)100T，為延長反應(yīng)時(shí)間故多給一瓶）；
標(biāo)準(zhǔn)品：0.5 μmol/mL*酚標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明：
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響，根據(jù)最適pH范圍，通常分為酸性、中性和堿性三種類型。

堿性環(huán)境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成*酚和磷酸*二鈉，通過測定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、研缽、蒸餾水、30-50目篩、乙醇和甲苯（不允許快遞）。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
1. 新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干，過30~50目篩。
2. 稱取風(fēng)干混勻土壤約0.1g，加入0.05mL甲苯（自備），輕搖15min；加0.4mL試劑一并且搖勻后，置于37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱，開始計(jì)時(shí)，催化反應(yīng)24h；到時(shí)后迅速加入1mL試劑二充分混勻，以終止酶催化的反應(yīng)。

10000rpm室溫離心10min，取上清液置于冰上待測。
二、測定步驟

分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長到660nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。
空白管：取微量比色皿/96孔板，加入10μL試劑一，20μL試劑三，4μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水166μL，混勻后室溫靜置30min，于660nm測定吸光度，記為A空白管。（空白管只需要測定1-2次）
標(biāo)準(zhǔn)管：取微量比色皿/96孔板，加入10μL標(biāo)準(zhǔn)液，20μL試劑三，4μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水166μL，混勻后室溫靜置30min，于660nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。（標(biāo)準(zhǔn)管只需要測定1-2次）
測定管：取微量比色皿/96孔板，加入10μL上清液，20μL試劑三，4μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水166μL，混勻后室溫靜置30min，于660nm測定吸光度，記為A測定管。

三、S-AKP/ALP活性計(jì)算
活性單位定義：37℃中每克土壤每天釋放1nmol酚為1個(gè)酶活單位。
S-AKP/ALP活性（U/g 土樣）=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)]×V總÷W÷T×1000
=725×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)液：0.5μmol/mL；V總：催化體系總體積，1.45mL；W：土壤樣本質(zhì)量，g；T：催化反應(yīng)時(shí)間，24 h=1d；1000：單位換算系數(shù)，1μmol=1000nmol。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

Liu B, Wang S, Wang J, et al. The great potential for phytoremediation of abandoned tailings pond using ectomycorrhizal Pinus sylvestris[J]. Science of The Total Environment, 2020, 719: 137475.
Shao T, Zhao J J, Liu A, et al. Effects of soil physicochemical properties on microbial communities in different ecological niches in coastal area[J]. Applied Soil Ecology, 2020: 103486.

參考文獻(xiàn)：

Guan S. Soil Enzyme and Its Research Method [M]. Beijing: Science Press, 1982.

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