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NADP-蘋(píng)果酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 輔酶
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱(chēng)
NADP-蘋(píng)果酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 輔酶
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱(chēng)
NADP-Malate Dehydrogenase(NAD-MDH) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào):BC1050-50T/48S

更新時(shí)間:2024-04-24

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :1768

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產(chǎn)品介紹

NADP-蘋(píng)果酸脫氫酶(NADP-MDH)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
紫外分光光度法
貨號(hào):BC1050
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱(chēng)規(guī)格保存條件
提取液液體50 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體40 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×2支-20℃保存
試劑三粉劑×2支-20℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:臨用前加入250 μL雙蒸水,用不完的試劑仍-20℃保存;

  2. 試劑三:臨用前加入300 μL雙蒸水,用不完的試劑仍-20℃保存。

產(chǎn)品說(shuō)明:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋(píng)果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋(píng)果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物,連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、蘋(píng)果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,NADP-MDH主要存在于真核細(xì)胞中。
NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋(píng)果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng):

  1. 樣本的提取必須在0℃-4℃中操做完成,以防止酶變性失活。

  2. 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑二、試劑三和樣本在冰上放置,以免變性和失活。試劑一37℃放置。

  3. 建議一人加樣一人比色。盡量保持反應(yīng)溫度為37℃。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取0.1g大鼠心臟組織加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定=0.694-0.628=0.066,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.652-0.643=0.009,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.057,按樣本鮮重計(jì)算酶活得:

NADP-MDH(U/g 鮮重)=6430×ΔA÷W=6430×0.057÷0.1=3665.1 U/g 鮮重。
參考文獻(xiàn):

  1. Yao Y X, Li M, Zhai H, et al. Isolation and characterization of an apple cytosolic malate dehydrogenase gene reveal its function in malate synthesis[J]. Journal of plant physiology, 2011, 168(5): 474-480.

相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0310/BC0315 輔酶Ⅰ NAD(H)含量檢測(cè)試劑盒
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BC1130/BC1135 NAD-蘋(píng)果酸酶(NAD-ME)活性檢測(cè)試劑盒

NADP-蘋(píng)果酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 輔酶 NADP-蘋(píng)果酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 輔酶


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