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| 品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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| 分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
| 分子量 | 詳詢 | 貨號(hào) | BC3810 |
| 規(guī)格 | 20T/50T/100T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | Caspase-1活性測(cè)定 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合 |
Caspase-1活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
比色法
貨號(hào)：BC3810
規(guī)格：20T、50T、100T
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱/規(guī)格 | 20T | 50T | 100T | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體20 mL×1瓶 | 液體20 mL×1瓶 | 液體25 mL×1瓶 | -20℃保存 |
| 試劑二 | 液體30 mL×1瓶 | 液體60 mL×1瓶 | 液體120 mL×1瓶 | -20℃保存 |
| 試劑三 | 液體0.25 mL×1支 | 液體0.55 mL×1支 | 液體0.55 mL×2支 | -20℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 液體1mL×1支 | 液體1 mL×1支 | 液體1 mL×1支 | -20℃保存 |
溶液的配制：
試劑一：分裝-20℃保存。
試劑二：分裝-20℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)液：pNA標(biāo)準(zhǔn)溶液，5 mmol/L。標(biāo)準(zhǔn)溶液在4℃條件下為渾濁狀態(tài)，溶解即可變?yōu)槌吻鍫顟B(tài)，不影響使用。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液配制：取9 mL試劑一加入1 mL試劑二，充分混勻待用。（也可按照試劑一：試劑二=9:1的比例，自行配制）。
產(chǎn)品說(shuō)明：
Caspase是參與細(xì)胞凋亡過(guò)程的蛋白酶家族，包含10多個(gè)成員。Caspase-1是可剪切 IL-1b和IL-18前體產(chǎn)生活性細(xì)胞因子的caspase。Caspase-1通過(guò)剪切Bcl-XL調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，并通過(guò)對(duì)細(xì)胞因子前體的剪切來(lái)調(diào)控相關(guān)細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫炎性反應(yīng)。基于Caspase-1特異水解多肽底物Tyr-Val-Ala-Asp-p-nitroanilide (YVAD-pNA)，釋放的游離硝 基苯胺pNA在405 nm有最大吸收峰。采用可見光光度比色法測(cè)定pNA而得到Caspase活性。適用于檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織、細(xì)胞Caspase-1活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、100μL玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體的操作步驟請(qǐng)見“產(chǎn)品資料"文件
注意事項(xiàng)：
1、由于試劑二一中含有還原劑（DTT），建議將樣品用水稀釋2倍后，用Bradford法測(cè)定蛋白濃度，以降低DTT對(duì)蛋白濃度測(cè)定的干擾。不建議使用BCA法測(cè)定蛋白濃度。
2、Caspase活性測(cè)定值低最常見的原因是細(xì)胞未發(fā)生凋亡或細(xì)胞量太少，其次是觀測(cè)時(shí)間不恰當(dāng)。誘導(dǎo)凋亡時(shí)，并非劑量越大時(shí)間越長(zhǎng)Caspase活性就越高。建議設(shè)置不同劑量和時(shí)間點(diǎn)如0、2、4、8、16、24小時(shí)，以檢測(cè)最佳的觀察點(diǎn)。
3、所測(cè)樣本的值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線，可用試劑二稀釋樣本后重新測(cè)定。
4、蓋緊96孔板蓋子并用封口膜密封。37oC孵育，肉眼可見顏色變黃時(shí)的OD405值約為0.2，此時(shí)即可測(cè)定。顏色變化不明顯可延長(zhǎng)反應(yīng)或過(guò)夜，但酶活性較強(qiáng)時(shí)，孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)將導(dǎo)致反應(yīng)失去線性關(guān)系。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：
Ren N, Jiang T, Wang C, et al. LncRNA ADAMTS9-AS2 inhibits gastric cancer (GC) development and sensitizes chemoresistant GC cells to cisplatin by regulating miR-223-3p/NLRP3 axis[J]. Aging (Albany NY), 2020, 12(11).
Chai D, Qiu D, Zhang Z, et al. Ab sent in melanoma 2 enhances anti‐tumour effects of CAIX promotor controlled conditionally replicative adenovirus in renal cancer[J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2020.
Liao T, Ding L, Wu P, et al. Chrysin Attenuates the NLRP3 Inflammasome Cascade to Reduce Synovitis and Pain in KOA Rats[J]. Drug Design, Development and Therapy, 2020, Volume 14:3015-3027.
參考文獻(xiàn)：
Cohen GM. Caspases: the executioners of apoptosis. Biochem J, 1997, 326: 1-16.
Janicke R U, Sprengart M L, Wati M R, et al. Emerging role of caspase-3 in apoptosis[J]. Cell Death and Differentiation, 1999, 6:99-104.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC3820 Caspase-2活性檢測(cè)試劑盒
BC3830 Caspase-3活性檢測(cè)試劑盒
BC3840 Caspase-4活性測(cè)定試劑盒
BC3850 Caspase-5活性檢測(cè)試劑盒
BC3860 Caspase-6活性檢測(cè)試劑盒
BC3880 Caspase-8活性檢測(cè)試劑盒
BC3890 Caspase-9活性檢測(cè)試劑盒
Caspase-1活性測(cè)定試劑盒 比色法 Caspase-1活性測(cè)定試劑盒 比色法
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