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土壤亮*酸氨基肽酶活性檢測試劑盒 微量法
產品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
土壤亮*酸氨基肽酶活性檢測試劑盒 微量法
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Soil Leucine Arylamidase(S-LAP) Activity Assay Kit
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網站說明書

產品型號:BC4025-100T/48S

更新時間:2024-04-12

廠商性質:生產廠家

訪 問 量 :856

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010-50973130

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土壤亮*酸氨基肽酶(S-LAP)活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC4025
規(guī)格:100T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×2瓶2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:臨用前取1瓶加入1.875 mL丙 酮溶解,用不完的試劑2-8℃保存一周。

產品說明:
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮*酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關。
S-LAP分解L-亮*酸對硝基 苯胺生成對硝基 苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、離心機、水浴鍋、研缽、甲苯(不允許快遞)、丙 酮(不允許快遞)、30-50目篩、蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
取新鮮土樣自然風干或37℃烘干,過30-50目篩。
二、測定步驟

  1. 分光光度計/酶標儀預熱30min以上,波長調至405nm,分光光度計蒸餾水調零。

  2. 加樣表:


測定管對照管
風干土樣(g)0.030.03
甲苯(μL)1515
震蕩混勻,室溫靜置15min。
試劑一(μL)255255
  試劑二(μL)30-
置于30℃水浴鍋準確反應1h后,立刻煮沸5min(蓋緊,纏封口膜,防止崩開水分散失)。流水冷卻至室溫。
試劑二(μL)-30
14000g,常溫離心10min,取200μL上清于405nm處測定吸光值,分別記為A測定管、A對照管,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設一個對照管。


實驗實例:

  1. 稱取兩管0.03g三葉草土樣,分別記為測定管和對照管,按照測定步驟操作,用96孔板測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.6-0.17=0.43,計算酶活得:

S-LAP活性(U/g 土樣)=0.844×ΔA÷W=0.844×0.43÷0.03=12.097U/g 土樣。

  1. 稱取兩管0.03g土樣,分別記為測定管和對照管,按照測定步驟操作,用96孔板測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.569-0.128=0.441,計算酶活得:

S-LAP活性(U/g 土樣)=0.844×ΔA÷W=0.844×0.441÷0.03=12.407U/g 土樣。
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土壤亮*酸氨基肽酶活性檢測試劑盒 微量法 土壤亮*酸氨基肽酶活性檢測試劑盒 微量法

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