疏水層析填料DEAE Sephadex A－25 瓊脂糖凝膠
貨號(hào) ：D8300
規(guī)格 ：25ml

簡(jiǎn)介
   丁基-瓊脂糖凝膠 4B是將苯基鍵合在瓊脂糖凝膠4B上形成的一種可利用疏水相互作用來實(shí)現(xiàn)目標(biāo)產(chǎn)品純化分離的疏水類介質(zhì)。用于生物大分子和乙肝疫苗的純化分離。
   本品呈白色球狀凝膠，無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。
理化 特性

*柱子：內(nèi)徑16mm、柱長(zhǎng)10cm，柱床高5cm，25℃，流動(dòng)相為0.1mol/LNaCl。

三 、  適用范圍
    丁基-瓊脂糖凝膠 4B是一種疏水層析介質(zhì)，利用樣品中組分疏水性的不同進(jìn)行分離。用于生物大分子的純化分離。

四 、 保存條件
    產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在 4℃~30℃（保存溶液為 20% 乙醇+0.1M 醋酸鈉） ，通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過的柱子貯存在 4℃（20% 乙醇） 。
保質(zhì)期：5 年。

五 、 操作步驟 ：
1 、 裝柱
    （1）讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液。
    （2）根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠，清洗掉 20%乙醇，抽干，用初始緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1 的比例）配成勻漿。
    （3）將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜） ，務(wù)必使底端無氣泡。
    （4）用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。
    （5）打開蠕動(dòng)泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的 1.33 倍的流速流過，使柱床穩(wěn)定。用 2~3 倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2 、 平衡
     讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和 pH 不變。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液，如 0.02~0.05mol/L 的 PBS 加 1~2.5mol/L(NH4)2SO4 等。
3 、 上樣
    （1）樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。
    （2）一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)物。
    （3）介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的疏水性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和溫度。鹽濃度大、溫度高或樣品組分疏水性強(qiáng)，介質(zhì)對(duì)組分吸附牢。
4 、 洗脫
     疏水介質(zhì)可用減小鹽濃度進(jìn)行洗脫。加表面活性劑或有機(jī)溶劑可加強(qiáng)洗脫。常用的洗脫液是低鹽濃度緩沖液，如 0.02~0.05mol/L 的 PBS。
5 、 再生
    一般用低鹽濃度的緩沖液洗，洗 10 倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
6 、 在位清洗
  （1）對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用 2M Nacl 去除。
  （2）對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類，可用 1M NaOH 去除。
  （3）對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，用 4~10 倍柱體積的 70%乙醇或 30%異丙醇清洗，但     要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。
    清洗完畢后，用少 3 倍緩沖液平衡柱子。
7 、 注意
    在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入。
8 、 去熱源
    用 0.5M 的*清洗柱子 5~6 小時(shí)或用 0.1M 的* 24 小時(shí)。或用以下方法步驟去除：

（1）2 倍柱體積的 70%乙醇；
（2）2 倍柱體積 50mM Tris-HCl pH7.5；
（3）1 倍柱體積 4M 尿素；
（4）3 倍柱體積的 Tris 緩沖液+0.1M NaCl；
以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。

9 、  消毒
    用 0.5~1M NaOH 室溫下洗 8~10 倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。

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1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。