分子診斷是以核酸作為檢測(cè)對(duì)象，主要應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室各類(lèi)疾病的診斷中，如腫瘤、感染、遺傳等，而核酸提取是分子診斷實(shí)驗(yàn)的“開(kāi)始”。

　　

　　幾乎所有實(shí)驗(yàn)均是以核酸提取為基礎(chǔ)，無(wú)論后續(xù)的克隆、PCR、qPCR、建庫(kù)、測(cè)序等都需要核酸提取以后才能順利進(jìn)行。核酸提取純化質(zhì)量是保證核酸檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的前提，也是分子診斷行業(yè)發(fā)展的前提。

　　

　　核酸提取又叫核酸提取純化，簡(jiǎn)單點(diǎn)就是裂解+純化。裂解就是通過(guò)溫度以及試劑將樣本中的核酸游離在裂解液體系的過(guò)程。純化就是使核酸與裂解體系中的其他雜質(zhì)成分比如蛋白質(zhì)，鹽等徹底分離的過(guò)程。

　　

　　核酸的檢測(cè)方法：檢測(cè)核酸質(zhì)量的方法有很多，實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的方法就是凝膠電泳、紫外分光光度計(jì)、PCR擴(kuò)增。

　　

　　PCR與電泳到底誰(shuí)強(qiáng)？

　　

　　眾所周知，土壤核酸提取很容易失敗，原因在于土壤通常是富含腐殖酸以及腐殖酸類(lèi)似物。核酸提取的過(guò)程中，如果雜質(zhì)去除的不干凈就會(huì)直接影響下游的PCR實(shí)驗(yàn)。

　　

　　曾有人說(shuō)，你看我土壤提取的濃度多高，但是一做PCR擴(kuò)增就發(fā)現(xiàn)電泳一片“漆黑”，新手總是百思不得其解。

　　

　　其實(shí)很容易理解，因?yàn)楹怂崽崛『蟮碾娪緢D只能輔助我們判斷提取的核酸的濃度，并不能成為檢測(cè)核酸質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)。要想判斷核酸提取的成功，做PCR擴(kuò)增是直接、簡(jiǎn)單的方式。