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當前位置:首頁技術(shù)文章小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒的試驗原理

小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒的試驗原理

更新時間:2011-05-11點擊次數(shù):2147

公司自研究所改制以來在分子生物學試劑盒、熒光定量PCR、siRNA載體構(gòu)建、全基因合成拼接、熒光探針修飾、多肽合成、dNTP、Pfu酶、熱啟動Taq酶、DNA marker、基因工程、原生質(zhì)體的培養(yǎng)、細胞融合、單克隆抗體診斷試劑等研究方向作了深入的研究。下面簡單解說小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒的試驗原理及配備。

小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制:
試劑盒成份 96孔配置 48孔配置
96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T)
塑料膜板蓋 1塊 半塊
標準品:240ng/ml 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml)
空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml)
標準品稀釋緩沖液 1瓶(8.0ml) 1瓶(4.0ml)
生物素標記的抗HYD抗體 1瓶(8.0ml) 1瓶(4.0ml)
親和鏈酶素-HRP 1瓶(12ml) 1瓶(5ml)
洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml)
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)
終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)

 

小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒試驗原理:
HYD試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知HYD濃度的標準品、未知濃度的樣品 加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將HYD和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HYD的濃度呈比例關(guān)系。
 

 

自備材料:
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
 

小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法:

1、 血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存……如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

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